邁迪安的可風干植物直擴qPCR預(yù)混液(MDX116)是一種無甘油、抗抑性的預(yù)混液，專門為開發(fā)從植物樣本中免核酸提取、進行DNA直擴的常溫穩(wěn)定型檢測設(shè)計的一款qPCR試劑，適用于從植物裂解液中直接進行DNA擴增和對低量污染物的高靈敏度識別，具有多重檢測中高度重現(xiàn)性的穩(wěn)健擴增。

可風干植物直擴qPCR預(yù)混液是市面上shou款用于開發(fā)常溫穩(wěn)定的植物DNA直擴的產(chǎn)品。它結(jié)合了抗抑性和可風干的優(yōu)勢，為開發(fā)高靈敏度，低成本的植物檢測提供了理想的解決方案。一小塊植物葉片在SDS裂解液、堿性裂解液或水中加熱裂解后直接加入風干的反應(yīng)預(yù)混液中即可進行擴增反應(yīng)，獲得高靈敏度和可重復(fù)性的檢測結(jié)果。

可風干植物qPCR預(yù)混液在干燥前后均能從使用不同裂解液的植物裂解樣本中進行高效擴增：

將一片番茄葉穿孔樣本分別加入 (A) 26 μL 0.1% SDS裂解液 和 (B) 堿性裂解液 （20 μL 0.2M NaOH +6 μL 2M Tris-HCl, pH 7.5）在95 °C加熱5分鐘裂解。分別使用干燥前后的可風干植物直擴qPCR預(yù)混液對含有5% 和25% 的植物裂解液直接進行擴增，檢測番茄Hsp21基因，對比預(yù)混液干燥前后的擴增性能。

左圖：使用SDS裂解液，棕色為濕液擴增曲線，橙色為使用干燥預(yù)混液的擴增曲線。

右圖：使用堿性裂解液，綠色為濕液擴增曲線，橙色為使用干燥預(yù)混液的擴增曲線。

結(jié)果表明，可風干植物qPCR預(yù)混液在干燥前后均能從使用不同裂解液的植物裂解樣本中進行高效擴增。

對低量污染物的高靈敏度識別：

在可風干植物直擴qPCR預(yù)混液中加入水稻ATPe引物和探針，然后將混合物進行風干。分別向40%的番茄葉堿性裂解液中加入1000拷貝(棕色)、100拷貝(橙色)、10拷貝(綠色)和1拷貝(藍色)的水稻基因組DNA，然后用該樣本復(fù)溶風干的反應(yīng)混合物，直接進行qPCR擴增。結(jié)果顯示，可風干植物直擴qPCR預(yù)混液zui低可以檢測到番茄裂解液樣本中1個拷貝的水稻ATPe ，并且達到100%的擴增。

重檢測中高度重現(xiàn)性的穩(wěn)健擴增：

將水稻ATPe基因(每反應(yīng)100個拷貝)和qPCR提取內(nèi)控DNA(MDX027)添加到25%的番茄葉堿性裂解液中，然后用來復(fù)溶干燥的可風干植物直擴qPCR預(yù)混液，對番茄Hsp21基因(棕色)、水稻ATPe(綠色)和qPCR提取內(nèi)控DNA(橙色)直接進行擴增，每個樣本均有12個重復(fù)。結(jié)果顯示了可風干植物直擴qPCR預(yù)混液在多重反應(yīng)中的高度重現(xiàn)性。

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